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      LONZA內毒素檢測鱟試劑盒代理
      發布時間:2021年01月26日

      分離提取自鱟血的鱟試劑(Limulus Amebocyte Lysate,美洲鱟試劑,簡稱LAL),是一種歷史悠久、使用廣泛的細菌內毒素檢測試劑,被各國藥典所認可。Lonza品牌的內毒素檢測用鱟試劑產品,已有近40年的研發應用歷史,并獲得了美國FDA認證(License No.1775)。

      目前,北京澤平代理的LONZA品牌提供多種檢測方法的鱟試劑產品,包括美洲鱟試劑(LAL)、不依賴于鱟血的重組C因子試劑,以及配套使用的酶標儀、熒光檢測儀,提供符合FDA Part 11的內毒素檢測專用軟件等,可實現0.005-100EU/mL范圍的內毒素定性、定量檢測。


      一、動態顯色法鱟試劑

      Lonza動態顯色法鱟試劑(Kinetic-QCL Kinetic Chromogenic LAL Assay,簡稱KQCL),是一種動態、定量檢測內毒素的試劑盒。在內毒素的存在下,動態顯色法鱟試劑將無色的發光短肽底物中的顯色基團PNA切下,使溶液呈現,顏色變化的時間和內毒素含量呈負相關,通過檢測分光光度計405nm下的光密度OD值變化,繪制內毒素濃度標準曲線,即可計算出未知樣本中的內毒素含量。

      Lonza動態顯色法鱟試劑,是Lonza最靈敏的內毒素檢測試劑,無需形成凝膠,相比凝膠法、濁度法,受到的抑制反應更少,抗干擾能力最強,檢測范圍廣(405nm處吸光的深樣品不可用),其0.005-50EU/mL的靈敏度,非常適合生物制品如疫苗、抗生素等檢測。

      使用時,將混合有鱟試劑和底物的凍干粉復溶,放入96孔板中,加入待測樣品,在405nm吸光度檢測顏色變化,動態監控其顯色反應時長,反應時間約1小時后(根據內毒素限值而定),計算樣品內毒素含量。
       
      動態顯色法鱟試劑 Kinetic-QCL Kinetic Chromogenic LAL Assay

       
       
      二、動態濁度法鱟試劑

      Lonza動態濁度法鱟試劑(PYROGENT-5000 Kinetic Turbidimetric LAL Assay),是一種動態、定量檢測內毒素的試劑盒。內毒素存在下,動態濁度法鱟試劑形成凝膠,使溶液變渾濁,濁度變化的時間與內毒素含量成反比,通過檢測吸光度變化時間,建立內毒素標準曲線,可以計算出未知樣品中的內毒素含量。

      Lonza動態顯色法鱟試劑,靈敏度0.01-100EU/mL,檢測范圍大,可以檢測有色樣品,按照美國FDA相關許可生產,當檢測水和大容量液體時更具性價比。

      使用時,將鱟試劑和緩沖液混合,置于中37℃孵育,添加樣品混勻后,動態檢測濁度變化,反應時間約1小時后(根據內毒素限值而定),計算樣品內毒素含量。

      動態濁度法鱟試劑 PYROGENT-5000 Kinetic Turbidimetric LAL Assay

       

      三、重組C因子熒光檢測試劑盒

      Lonza PyroGene重組C因子內毒素檢測試劑盒(PyroGene Recombinant Factor C Endpoint Fluorescent Assay),是一種終點法、定量檢測內毒素的試劑。其不含鱟血成分,是LAL鱟試劑的可持續替代方案。C因子是鱟試劑酶促反應中的第一個組成部分,重組生產的C因子(rFC),在內毒素存在下被激活,不激活LAL級聯反應中的其他酶,而是直接裂解熒光底物,釋放熒光,建立內毒素標準曲線,可計算樣品的內毒素含量。

      Lonza重組C因子熒光檢測試劑盒,采用終點分析法,高通量分析更簡單,熒光信號范圍廣,只需一步反應,靈敏度0.005-5EU/mL,消除了葡聚糖的假陽性,具有更高的內毒素特異性,非動物源成分,批次間差異小,重復性高。繼歐洲藥典(EP)、日本藥典(JP)、美國藥典(USP)之后,第4版本的中國藥典將重組C因子法列為細菌內毒素檢測方法,并在2020年生效。

      使用時,Lonza重組C因子試劑為液態,可按需取用不會浪費試劑,在96孔板中與待測樣品混合,孵育1小時,使用380/440nm的激發/發射波長,計算樣品內毒素含量。

      重組C因子內毒素檢測試劑盒 PyroGene Recombinant Factor C Endpoint Fluorescent Assay

       

      四、終點顯色法鱟試劑

      Lonza終點顯色法鱟試劑(QCL-1000 Endpoint Chromogenic LAL Assay),是一種終點法、定量檢測內毒素的試劑,是Lonza鱟試劑中最快速的檢測方法。在內毒素存在下,終點顯色法鱟試劑分解底物,使溶液變為,測定405-410nm下的OD值,建立標準曲線,可計算樣品內毒素含量。

      Lonza終點顯色法鱟試劑,16分鐘快速檢測,僅需一個多道移液器、一個干熱裝置和一個96孔板。將樣品加入96孔板,37℃孵育10分鐘,添加顯色底物,37℃孵育6分鐘,添加終止緩沖液,測定405-410nm OD值。
       
      終點顯色法鱟試劑 QCL-1000 Endpoint Chromogenic LAL Assay



      五、凝膠法鱟試劑

      Lonza凝膠法鱟試劑(PYROGENT  Gel Clot LAL Assay),是一種內毒素的限量檢測方法。將鱟試劑和樣品置于37℃水浴或金屬浴中的試管中,孵育1小時,將試管翻轉180°,如凝塊牢固地附著在試管底部,表明內毒素為陽性。如凝塊向下流動,則內毒素為陰性。

      Lonza凝膠法鱟試劑提供0.03、0.06、0.125、0.25EU/mL的靈敏度,定量結果通過肉眼觀察凝膠形成,不需要復雜的儀器和軟件,簡便易讀,成本低。但實驗結果容易受到振動、溫度等干擾。

      與其它酶促反應一樣,凝膠法測定依賴于pH值。Lonza PYROGENT凝膠法鱟試劑包含的緩沖液,使測試前不需要調整樣品pH值。

      凝膠法鱟試劑 PYROGENT  Gel Clot LAL Assay

       

      六、內毒素檢測儀器和軟件

      1、WinKQCL內毒素檢測軟件

      Lonza專為內毒素檢測設計的WinKQCL軟件,符合美國FDA 21 CFR Part 11對電子記錄和簽名、審計跟蹤和數據庫歸檔的技術要求,企業級的數據庫存儲模式,保障了數據完整性、真實性、安全性。趨勢分析功能,預判各批次內毒素含量超標情況,讓結果分析以及查找更高效。九種語言模式,中英界面快捷切換。能結合LIMS、LIS、MODA等實驗室信息管理系統,并可以在Citrix系統上操作。

      WinKQCL內毒素檢測軟件

      支持大量常規酶標儀:

      ①光吸收酶標儀
      BioTek ELx808
      BioTek Eon
      Molecular Devices SpectraMax 340PC,340PC384, Plus384 and 190PC
      Molecular Devices VersaMax
      Tecan Sunrise


      ②熒光酶標儀
      Lonza PyroWave
      BioTek FLx800
      Molecular Devices Gemini EM, Gemini XPS and Gemini XS


      ③多功能酶標儀(光吸收和熒光酶標儀)
      BioTek Synergy 2
      Molecular Devices SpectraMax M2, M2e, M3,M4, M5 and M5e
      Molecular Devices FlexStation

       

      2、ELx808酶標儀

      專業用于Lonza Kinetic-QCL動態顯色法鱟試劑、PYROGENT-5000動態濁度法鱟試劑的酶標儀,并可作為標準分光光度計,用于QCL-1000終點顯色法鱟試劑檢測。96孔板全自動讀取,可存儲多達55個試劑盒、測試結果、標準曲線。優秀的溫度均勻性,高精確性,根據鱟試劑優化配置,已作為Lonza內毒素檢測系統的一部分進行了驗證,可無縫對接WinKQCL軟件,用于內毒素檢測的供應商QC放行檢測。

      lonza內毒素檢測儀器 ELx808酶標儀


      3、PyroWave XM 熒光酶標儀

      專業用于Lonza PyroGene重組C因子熒光檢測試劑盒,并可作為光度計,可無縫對接WinKQCL軟件。具有優秀的溫度均勻性,簡單易用,根據重組C因子優化配置,用于內毒素檢測的供應商QC放行檢測。

      lonza內毒素檢測儀器 PyroWave XM 熒光酶標儀

       
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